Ген BRAF и его мутации¶

Ген BRAF — ген, кодирующий серин-треониновую протеинкиназу B-Raf, ключевой компонент сигнального пути MAPK (RAS–RAF–MEK–ERK), регулирующего пролиферацию, дифференцировку и выживание клеток. Локализован на длинном плече хромосомы 7 (локус 7q34). Мутации BRAF относятся к числу наиболее распространённых онкогенных драйверных изменений в солидных опухолях человека.

¶Структура и функция белка

B-Raf состоит примерно из 766 аминокислот и включает три консервативных региона (CR1–CR3). CR1 и CR2 отвечают за связывание с RAS и аутоингибирование, CR3 содержит киназный домен. В норме активация происходит каскадно: рецепторные тирозинкиназы → RAS → RAF → MEK → ERK. Фосфорилирование ERK запускает транскрипцию генов, контролирующих клеточный цикл. Активация B-Raf строго регулируется и носит транзиторный характер.

¶Классификация мутаций

Мутации BRAF делят на три класса по механизму активации киназной активности.

Наиболее изучена мутация V600E — замена валина на глутаминовую кислоту в кодоне 600. Она имитирует фосфорилирование в активационном сегменте, обеспечивая постоянную киназную активность без внешнего стимула. На V600E приходится около 80 % всех мутаций BRAF.

¶Связанные заболевания

• Меланома кожи — V600E встречается примерно в 40–50 % случаев.
• Папиллярный рак щитовидной железы — до 45–60 %, часто при классическом варианте.
• Волосатоклеточный лейкоз — практически 100 % случаев.
• Колоректальный рак — около 8–12 %, коррелирует с неблагоприятным прогнозом.
• Лангергансоклеточный гистиоцитоз, ганглиоглиома, аденокарцинома лёгкого — реже.

Помимо соматических, описаны герминальные мутации при синдроме LEOPARD (кардио-фацио-кожный синдром) и синдроме Нунан, связанных с нарушением развития.

¶Диагностика

Определение статуса BRAF проводят методами ПЦР с детекцией в реальном времени, секвенированием по Сэнгеру, а также высокопроизводительным секвенированием (NGS). Для меланомы и рака лёгкого применяют иммуногистохимию со специфическими антителами к V600E. Тестирование обязательно перед назначением таргетной терапии.

¶Таргетная терапия

Ингибиторы BRAF — вемурафениб, дабрафениб, энкорафениб — избирательно блокируют мутантную киназу. При меланоме монотерапия даёт ответ у 50–60 % пациентов, однако быстро развивается резистентность через реактивацию MAPK-пути. Комбинация с ингибиторами MEK (траметиниб, кобиметиниб) увеличивает выживаемость без прогрессирования и снижает риск кожных осложнений. При колоректальном раке с V600E эффективность выше у трёхкомпонентных схем, включающих антитела к EGFR.

¶Прогностическое значение

Наличие V600E при колоректальном раке ассоциировано с худшим ответом на анти-EGFR-терапию и снижением общей выживаемости. При меланоме прогностическая роль неоднозначна, но мутация служит предиктором ответа на таргетные препараты. При папиллярном раке щитовидной железы мутация связана с более высоким риском рецидива.