Аферез в заготовке стволовых клеток¶

Аферез в заготовке стволовых клеток — метод получения гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) из периферической крови с помощью аппаратного разделения крови на компоненты. Процедура относится к экстракорпоральным методам обработки крови и применяется преимущественно для последующей трансплантации костного мозга, а также в клеточной терапии. В отличие от забора костного мозга под наркозом, аферез позволяет получать клетки из венозного доступа без хирургического вмешательства.

¶Физиологические основы

В норме концентрация ГСК в периферической крови низка. Для их массового выхода в кровоток применяют мобилизацию — введение гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ, филграстим) в течение нескольких дней, иногда в сочетании с химиотерапией или антагонистом CXCR4 (плериксафор). Под действием этих агентов стволовые клетки покидают костномозговые ниши и поступают в циркуляцию. Оценку их числа ведут по маркеру CD34+: пороговым для успешного сбора считается уровень порядка 10–20 клеток CD34+ на микролитр.

¶Принцип работы

Аферез основан на разделении крови по плотности и массе в центрифужной камере или на мембранных фильтрах. Кровь забирается из одной вены, стабилизируется цитратом натрия, разделяется на фракции, а целевая фракция — лейкоцитарная плёнка, обогащённая мононуклеарами, — отводится в отдельный мешок. Остальные компоненты возвращаются пациенту или донору. За один сеанс обрабатывается несколько объёмов циркулирующей крови, что занимает от двух до пяти часов.

¶Основные разновидности

• Лейкаферез — неселективный сбор лейкоцитарной массы, наиболее распространён при мобилизованных ГСК.
• Селективный (иммуномагнитный) сбор — дополнительное обогащение CD34+ с помощью антительных колонок.
• Каскадный и мембранный плазмаферез — варианты, применяемые при необходимости одновременной коррекции плазменных факторов.

¶Показания и применение

Аферез ГСК используют при:

• аутологичной трансплантации при миеломе, лимфомах, солидных опухолях;
• аллогенной трансплантации от совместимого донора;
• заготовке клеток для генной терапии и тканевой инженерии;
• создании банков пуповинной крови и донорских регистров.

Ключевое преимущество — возможность получить достаточное для приживления количество клеток за одну-две процедуры, а также более быстрое восстановление кроветворения по сравнению с костномозговым забором.

¶Осложнения и ограничения

Нежелательные эффекты связаны с введением Г-КСФ (костные боли, спленомегалия, редко — разрыв селезёнки) и с самой процедурой (гипокальциемия из-за цитратной нагрузки, гипотензия, тромбоцитопения, реакции на антикоагулянт). У части пациентов мобилизация оказывается неэффективной, что требует повторных попыток или альтернативных схем. Аферез требует венозного доступа адекватного диаметра; при плохих периферических венах устанавливают центральный катетер.

¶Контроль качества

Эффективность сбора оценивают по числу CD34+ клеток на килограмм массы реципиента, жизнеспособности клеток и их способности к формированию колоний в культуре. Полученный продукт криоконсервируют в диметилсульфоксиде и хранят в жидком азоте до момента трансплантации.