Электрофорез белков сыворотки крови¶

Электрофорез белков сыворотки крови — лабораторный метод разделения белков сыворотки крови в электрическом поле на носителе (гель, мембрана, капилляр) с последующей визуализацией и количественной оценкой фракций. Применяется в клинической диагностике для выявления диспротеинемий — изменений соотношения белковых фракций, характерных для воспалительных, иммунологических, онкологических и нефрологических заболеваний.

¶Физический принцип

Белки в растворе при pH выше своей изоэлектрической точки несут отрицательный заряд и движутся к аноду. Скорость миграции зависит от заряда, размера и формы молекулы, а также от свойств среды (pH буфера, ионной силы, пористости носителя). Альбумин, имеющий малую молекулярную массу и высокий заряд, мигрирует быстрее глобулинов, что и обеспечивает их разделение на зоны.

¶Методика

Классическая процедура включает несколько этапов:

1. Нанесение сыворотки в стартовую зону носителя.
2. Электрофорез в буферном растворе при заданном напряжении и силе тока (обычно 30–60 минут).
3. Фиксация белков и окрашивание (амидочёрный, кумасси, бромфеноловый синий).
4. Денситометрия — измерение оптической плотности полос и расчёт процентного содержания фракций.

¶Фракции и нормы

При стандартном электрофорезе на ацетатцеллюлозе или агарозном геле выделяют пять основных фракций:

Референсные интервалы зависят от лаборатории, метода и возраста пациента.

¶Клиническое значение

Изменения электрофореграммы неспецифичны, но их типовые паттерны помогают в диагностике:

• Острый воспалительный ответ: снижение альбумина, рост α₁- и α₂-глобулинов.
• Нефротический синдром: выраженная гипоальбуминемия, увеличение α₂-фракции.
• Хронические инфекции и цирроз: поликлональное повышение γ-глобулинов.
• Моноклональная гаммапатия: узкая полоса (М-градиент) в зоне γ или β — признак миеломной болезни, макроглобулинемии Вальденстрёма.
• Дефицит иммуноглобулинов: снижение γ-фракции.

¶Модификации метода

Помимо зонального электрофореза, применяются:

• Капиллярный электрофорез — автоматизированный, с высокой разрешающей способностью.
• Изоэлектрофокусировка — разделение по изоэлектрическим точкам.
• Двумерный электрофорез — сочетание с изоэлектрофокусировкой для протеомного анализа.
• Иммуноэлектрофорез и иммунофиксация — идентификация моноклональных белков.

¶Ограничения

Метод даёт полуколичественную оценку и уступает в чувствительности иммунохимическим анализам. Интерпретация требует учёта клинической картины; для уточнения природы М-градиента необходима иммунофиксация или иммуноэлектрофорез.