Реакция Райта в диагностике бруцеллёза¶

Реакция Райта — серологический метод диагностики бруцеллёза, основанный на реакции агглютинации сыворотки крови пациента с бруцеллёзным диагностикумом. Относится к классическим методам иммунодиагностики и длительное время остаётся одним из основных способов подтверждения бруцеллёзной инфекции. Названа по имени английского врача-патолога Алмрота Райта, предложившего метод в начале XX века.

¶Принцип метода

В основе реакции лежит феномен агглютинации: при взаимодействии антител (агглютининов) сыворотки больного с антигенами возбудителя — убитыми бруцеллами, взвешенными в физиологическом растворе (диагностикум), — образуются видимые невооружённым глазом хлопья (агглютинат). Результат оценивают по степени просветления жидкости и величине осадка.

Для постановки используют стандартный бруцеллёзный диагностикум, чаще всего приготовленный из штаммов Brucella abortus (единый бруцеллёзный диагностикум). Реакцию ставят в пробирках с последовательными двукратными разведениями сыворотки, что позволяет определить титр антител.

¶Методика постановки

Кровь у пациента берут натощак из вены, получают сыворотку. Готовят ряд разведений — обычно от 1:25 до 1:400 и выше. В каждую пробирку вносят равный объём диагностикума, содержимое встряхивают и помещают в термостат при 37 °C на 18–24 часа, после чего учитывают результат. Возможна также ускоренная постановка реакции при более высокой температуре.

Учёт проводят по четырёхбалльной системе:

Диагностическим считается титр 1:100 и выше, однако оценка всегда проводится с учётом клинической картины, эпидемиологического анамнеза и динамики титра в парных сыворотках.

¶Диагностическое значение

Реакция Райта применяется для:

• подтверждения клинически подозрительных случаев бруцеллёза;
• обследования лиц из групп риска (животноводы, ветеринары, работники мясокомбинатов);
• ретроспективной диагностики и эпидемиологического анализа.

Антитела в диагностическом титре появляются обычно на 1–2-й неделе заболевания, нарастают к 3–4-й неделе и сохраняются длительно. Нарастание титра в 4 раза и более при исследовании парных сывороток с интервалом 10–14 дней считается убедительным подтверждением инфекции.

¶Ограничения и особенности

Метод не лишён недостатков:

• Ложноположительные результаты возможны при перекрёстных реакциях с другими грамотрицательными бактериями (например, Yersinia enterocolitica, Francisella tularensis), а также у вакцинированных против бруцеллёза.
• Ложноотрицательные результаты наблюдаются в ранние сроки, при иммунодефицитах, а также при блокировании антител избытком антигена (феномен прозоны).
• После перенесённого заболевания и после вакцинации антитела могут циркулировать годами, что затрудняет разграничение свежей и перенесённой инфекции.

Для повышения точности реакцию Райта дополняют другими серологическими тестами — реакцией Хеддльсона (пластинчатая агглютинация), реакцией Кумбса, ИФА, ПЦР. В современной практике реакция Райта сохраняет значение как доступный, недорогой и воспроизводимый скрининговый метод, особенно в условиях ограниченных ресурсов.

¶Историческая справка

Метод предложен А. Райтом и Д. Смитом в 1897 году в связи с изучением мальтийской (бруцеллёзной) лихорадки. Долгое время реакция Райта оставалась единственным серологическим способом диагностики бруцеллёза и до сих пор входит в перечень рекомендованных исследований в ряде национальных руководств.