Фаголизат: получение и применение¶

Фаголизат — препарат биологического происхождения, представляющий собой продукт лизиса (разрушения) бактериальных клеток под действием бактериофагов. Содержит фрагменты клеточных стенок, цитоплазматические белки, нуклеиновые кислоты, эндотоксины и остатки питательной среды, в которой культивировались бактерии-хозяева. Применяется в медицине, ветеринарии и биотехнологии как средство для специфической диагностики, профилактики и лечения инфекций, а также как сырьё для получения отдельных антигенных компонентов.

¶Получение

Технологический процесс получения фаголизата включает несколько последовательных этапов.

¶Культивирование бактерий-хозяев

Используют чистые культуры чувствительных к фагу штаммов бактерий (например, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli). Посев проводят на жидкие питательные среды (мясопептонный бульон, триптиказо-соевый бульон) при оптимальной температуре 37 °C до достижения определённой плотности биомассы.

¶Внесение фага и лизис

В культуру вносят вирулентный бактериофаг с известным титром. При множественности инфекции, достаточной для эффективной адсорбции, происходит размножение фага и лизис бактериальных клеток. Полноту лизиса контролируют по просветлению среды.

¶Очистка и консервация

Полученную суспензию центрифугируют или фильтруют для удаления неповреждённых клеток и крупного дебриса. Фильтрат может подвергаться дополнительной обработке: осаждению, диализу, стерилизующей фильтрации через мембраны с порами 0,22 мкм. Для стабилизации вводят консерванты (фенол, хинозол) либо лиофилизируют продукт.

Вариантом является автолизат — продукт спонтанного или индуцированного лизиса бактерий без участия фага, а также фаголизат, получаемый путём обработки уже убитых нагреванием клеток.

¶Состав и свойства

Состав фаголизата зависит от штамма-продуцента и условий культивирования. Основные компоненты:

Препарат, как правило, стерилен, прозрачен или слегка опалесцирует, имеет специфический запах. Активность оценивают по содержанию белка, антигенным свойствам или титру фага.

¶Применение

¶Диагностика

Фаголизаты используют в серологических реакциях (РПГА, ИФА, реакция агглютинации) для выявления антител и идентификации возбудителей. Антигены, входящие в состав, позволяют дифференцировать близкородственные штаммы.

¶Терапия и профилактика

В составе фаговых препаратов (стафилококковый, синегнойный, коли-фаг) фаголизаты применяются для лечения гнойно-воспалительных заболеваний, дисбактериоза, кишечных инфекций. Механизм связан как с действием самого фага, так и с иммуномодулирующим эффектом продуктов лизиса.

¶Ветеринария и биотехнология

Используются для профилактики инфекций у сельскохозяйственных животных, а также как источник антигенов при производстве вакцин и диагностических тест-систем.

¶Ограничения

Эффективность зависит от чувствительности конкретного штамма к фагу, возможна нейтрализация препарата антителами. Требуется индивидуальный подбор и контроль стерильности.